Sitios de unión para hormonas tiroideas en menbrana plasmática de globulos rojos de ratas y humanos
Cuatro proteínas de unión a 3, 5, 3' -triiodo-L-tironina citosólicas (CTBP) de eritrocitos humanos fueron aisladas, libres de hemoglobina, sobre una columna de DEAE-celulosa por gradiente lineal de NaCl (0 - 0,4 M). Las denominamos CTBP I, II, III y IV de acuerdo al orden de elución.- Las CTBP...
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Detalles Bibliográficos
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- Formato:
- Tesis Libro
- Lenguaje:
- español
- Publicado:
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Tucumán
Universidad Nacional de Tucumán, Fac. de Cs. Naturales e I.M.L.
1991
- Materias:
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| Sumario: | Cuatro proteínas de unión a 3, 5, 3' -triiodo-L-tironina citosólicas (CTBP) de eritrocitos humanos fueron aisladas, libres de hemoglobina, sobre una columna de DEAE-celulosa por gradiente lineal de NaCl (0 - 0,4 M). Las denominamos CTBP I, II, III y IV de acuerdo al orden de elución.- Las CTBP I, II y IV sufrieron una rápida pérdida de sus actividades de unión a la hormona a baja temperatura, mientras la CTBP III fue insensible al enfriamiento. La reactivación de las CTBPs inactivas por frío fue lograda por incubación de estas proteínas a 20 y 37ºC.- Las CTBP I, II y IV no fueron inhibidas por agentes bloqueantes de grupos -SH, en contraposición a CTBP III que sí lo fue.- El análisis de Scatchard de unión a la hormona, realizado sin aditivos al medio, mostró un sitio de alta afinidad con un Kd en el orden de 10 a la -10 M para CTBP II y Kds de aproximadamente 10 a la -9 M para CTBP I y CTBO IV, y de 10 a la -8 M para CTBP III. Las afinidades de CTBP III Y IV por la L-Ts pudo incrementarse por el agregado de B-ME y NADP-DTT al medio del ensayo, respectivamente.- El orden de afinidad por análogos de iodotironina fue similar para CTBP I, II y IV, pero diferente para CTBP III.- La estimación de los pesos moleculares de cada proteína se realizó mediante técnicas de cromatografía por filtración en gel (Sephacryl S-200 HR), obteniéndose valores estimativos de +/- 200.000, 200.000, 25.000 y 60.000 para CTBP I, II, III Y IV, respectivamente, cuando la elución se llevó a cabo a temperatura ambiente y sin aditivos en el buffer de corrida.- En base a las similitudes mostradas por CTBP I, II Y IV, se realizaron experimentos para encontrar una posible relación entre estas tres proteínas. Se pudo demostrar, por medio de técnicas de cromatografía por filtración en gel, que parámetros tales como temperatura, pH, e incubación con algunos reactivos agregados al medio, producen la interconversión entre formas monoméricas inactivas (CTBP IV - PM = 60.000) y tetraméricas biológicamente activas (CTBP I - PM = +/- 200.000 ¿pentámero? y CTBP II - PM 0 200.000).- Se ha podido establecer, además, una íntima relación bioquímica existente entre CTBP III y el sitio de unión a L-Ts solubilizado de membrana del glóbulo rojo humano.- Se discute la posible relevancia fisiológica de estas proteínas.- |
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| Descripción Física: | vii; 111 h. il., fot. ; 29 cm. |