Estudios bioquímicos y genéticos de bacteriocinas producidas por bacterias lácticas
Las bacteriocinas son sustancias proteicas producidas por una bacteria que puede producir la inhibición de otra. Con el fin de encontrar éste tipo de péptidos se realizó un muestreo de 330 cepas de distintos géneros y especies de bacterias lácticas del cepario de CERELA. Se seleccionaron 3 cepas de...
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Detalles Bibliográficos
- Autor principal:
- Formato:
- Tesis Libro
- Lenguaje:
- español
- Publicado:
-
Tucumán
Universidad Nacional de Tucumán - Facultad de Ciencias Naturales e Inst.M.Lillo
1996
- Materias:
- Etiquetas:
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| Sumario: | Las bacteriocinas son sustancias proteicas producidas por una bacteria que puede producir la inhibición de otra. Con el fin de encontrar éste tipo de péptidos se realizó un muestreo de 330 cepas de distintos géneros y especies de bacterias lácticas del cepario de CERELA. Se seleccionaron 3 cepas de enterococos y 1 de lactococo, que produjeron algún tipo de inhibición. Las pruebas realizadas obtenidas permitieron establecer que el efecto inhibitorio era producido por bacteriocinas. Estas se denominaron enterocinas CRL268, CRL291, CRL35 y lactococcina CRL504.- Enterocina CRL35 inhibió cepas patógenas, presentó un modo de acción bactericida, su máxima producción se detectó en la fase estacionaria tardía y fue estable bajo distintas temperaturas de almacenamiento. Esta bacteriocina fue purificaa resultando se un péptido de 3.500 Da, catiónico y altamente hidrofóbico. Se determino la secuencia de 18 aminoácidos del extremo amino terminal, que demostró tener una alta homología con la clase IIª de bacteriocinas. La cepa Enterococcus faecium CRL35 presentó un perfil plasmídico compuesto por 3 plásmidos (20.000, 4.000 y 2.000pb). A fin de obtener un mutante Bac-, la cepa productora fue sometida a condiciones de curado. El único plásmido que quedó después de este tratamiento fue el de alto PM. La cepa mutante no perdió el fenotipo Bac+.- A partir de la secuencia de aminoácidos, se diseño una sonda de ADN para determinar, mediante hibridización, la ubicación de los genes de enterocina CRL35, lo que permitió establecer que los mismos se encuentran en el plásmido de alto PM. Se realizó una biblioteca génica de este plásmido en el vector pBR328. Se obtuvieron 30 clones, los que fueron sometidos a hibridización con la sonda molecular antes descripta. De esta forma se determinó que los genes o parte de los mismos habían sido clonados en E. coli.- |
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| Descripción Física: | 128h. il., fot. ; 30 cm. |